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第一節 臨床血液學檢驗
血常規檢查
【 標 本 】
抗凝靜脈血（有些儀器也可用末梢血）。
【 方 法 】
血液細胞自動分析儀測定法。
【 試 劑 】
血液細胞自動分析儀配套試劑。
【 操 作 】
詳見自己實驗室血液細胞自動分析儀使用手冊。
【 附 注 】
1. 血常規包括白細胞計數及分類、紅細胞計數、血紅蛋白濃度、紅細胞比積、血小板計數等項目。這些項目亦有相應的手工方法，詳見有關資料。
2. 半自動及全自動血液細胞分析儀從設計上均要求用抗凝靜脈血。其優點為：
（1）靜脈血能正確地反映病人實際情況，重復性好；
（2）利于延長儀器的使用壽命；
（3）解決了采血盤的交叉感染問題等。
3. 血細胞計數應用EDTA·K2：為抗凝劑（EDTA·K2·2 H2O 1.5～2.2mg可抗凝1ml血）。
4. 貯血容器應選用有蓋塑料管?？鼓杉笤谑覝刂匈A存應不超過6h；如需制作血涂片應在2h內完成。
5. 測定前必須將EDTA·K2抗凝血充分混勻。
6. 血細胞分析儀測定最適溫度為18～22℃，低于15℃或高于30℃，均可使細胞體積發生改變，影響各參數的結果。
7. 血細胞分析儀用于白細胞分類只能當作一種過篩手段，當白細胞、紅細胞、血紅蛋白和血小板的任何一項有明顯
升高或降低；白細胞分類出現異常結果（中間細胞群百分率≥8.0%）；紅細胞、白細胞和血小板的任何一個直方圖出現異常圖形等情況，須用顯微鏡檢查及分類。
嗜酸性粒細胞直接計數
【 標 本 】
末梢血或抗凝靜脈血。
【 方 法 】
直接計數法。
【 試 劑 】
1. Hinkelmann液；
2. 乙醇- 伊紅稀釋液；
3. 伊紅- 丙酮稀釋液。
【 操 作 】
1．小試管中加稀釋液0.38ml。
2．常法取末梢血20ul，加入管內混勻，待紅細胞溶解后兩側充池。
3．靜置3～5min ，用低倍鏡（必要時用高倍鏡）鏡下計數10個大方格內嗜酸性粒細胞數?？倲怠?0×106=嗜酸性粒細胞/L。
【 附 注 】
1. 血液稀釋后應于1 h 內計數完畢。
2. 充池前要充分混勻，但又不宜用力過猛。
3. 住院病人采集標本時間力求統一，以免受日間生理變化的影響。
紅細胞沉降率測定
【 標 本 】
抗凝靜脈血。
【 方 法 】
魏氏法。
【 試 劑 】
109mmol/L枸櫞酸鈉溶液。
【 操 作 】
1. 3mm×100mm試管1支，在2ml容量處刻上記號，加抗凝劑0.4ml。
2. 靜脈采血后，取下針頭，加血至刻度，旋轉混合。
3. 用血沉管（300mm×2.5mm）吸取上述混勻血液至" 0 " 刻度處，拭去管外附著的血液，將管垂直立在血沉架上。
4. 記時，室溫中靜置1h，觀察血漿高度，以紅細胞下沉的毫米數報告之。
【 附 注 】
1. 紅細胞在單位時間內下沉的速度與血漿蛋白的量與質，血漿中脂類的量和質，紅細胞的大小與數量，是否成串錢相聚以及血沉管的內徑、清潔度、放置位置是否垂直，室溫高低等因素都有關系。
2. 標本采集時應空腹。
3. 血液和抗凝劑的比例要準確。
4. 血沉管內徑要標準（2.5mm），放置要垂直。
5. 做血沉的標本要在采集后3h 內測定，并充分混勻。
6. 室溫過低、過高和貧血時，對結果有影響。為此，血沉應盡量放在18～25℃室溫下測定。室溫過高時血沉加快，可以按溫度系數校正。室溫過低時血沉減慢，無法校正。
網織紅細胞計數
【 標 本 】
末梢血或抗凝靜脈血。
【 方 法 】
百分計數法。
【 試 劑 】
10g/L煌焦油藍生理鹽水溶液或10g/L煌焦油藍ACD溶液。
【 操 作 】
1. 于小試管中滴加1滴煌焦油藍生理鹽水溶液或煌焦油藍ACD溶液。
2. 加入末梢血或靜脈血2 滴于上述試管中，混勻。
3. 靜置15～20min 后，取用1 滴制成薄片。
4. 油鏡下檢查1000個紅細胞中網織紅細胞數，以百分率或絕對值報告。
【 附 注 】
1. 活體染色時間不能過短，室溫低時，放37℃溫箱。
2. 網織紅細胞也可用Miller窺盤計數法、熒光染色或流式細胞儀計數。
嗜堿性點彩紅細胞計數
【 標 本 】
末梢血。
【 方 法 】
百分計數法。
【 試 劑 】
1. 甲醇；
2. 堿性亞甲基藍染液（保存2～3周）。
【 操 作 】
1. 按常法制成薄血片，自然干燥后，用甲醇固定3min。
2. 用堿性亞甲基藍染液染色1～2min，水洗待干。
3. 用油鏡計數1000個紅細胞中嗜堿性點彩紅細胞數，以百分率報告。
【 附 注 】
1. 用堿性亞甲基藍染液染色后，紅細胞呈淺藍綠色，嗜堿性點彩呈深藍色。
2. 也可用瑞氏染色，嗜堿性點彩呈藍黑色。
3. 由于點彩紅細胞分布不勻，必要時擴大計數紅細胞數。
紅斑狼瘡細胞檢查
【 標 本 】
靜脈血。
【 方 法 】
改良血塊法。
【 操 作 】
1. 抽取患者血液2～3ml ，注于干燥試管內，于室溫待凝。
2. 于凝固剛形成時，用竹簽將凝塊攪碎，并將殘余凝塊除去。
3. 以2000r/分鐘離心沉淀10分鐘 ，使白細胞聚集在同一層面，以利于狼瘡細胞形成。
4. 置37℃溫箱內溫育2h。
5. 取出白細胞層及其上下各少許，置紅細胞比積管中，以2000r/分鐘離心，沉淀10分鐘。
6. 吸去上層液，輕輕吸取白細胞層，制成薄片3～4張。
7. 以瑞氏染液染色、鏡檢。
【 附 注 】
1. 整個操作時間不能超過3h。
2. 注意與果餡細胞鑒別。
一氧化碳血紅蛋白定性試驗
【 標 本 】
末梢血。
【 試 劑 】
50g/L NaOH。
【 操 作 】
1. 取試管2支，各加蒸餾水3～5ml，一管加患者血液三滴，另一管加正常人對照血3滴，混勻。此時，如患者血中有一氧化碳，則血液呈櫻桃紅色。
2. 每管各加50g/L NaOH1滴，輕輕混合，正常對照管呈綠褐色，如患者血液中有一氧化碳血紅蛋白，則溶血液仍呈櫻桃紅色，為陽性；如與正常對照色澤一致為陰性。
【 附 注 】
1. 觀察結果須及時，否則櫻桃紅色逐漸退去，不易分辨。
2. 本試驗敏感性較差，血液中一氧化碳含量到一定程度時才顯陽性。如患者事先已采取通氣措施，血中一氧化碳含量下降，試驗可陰性。但臨床癥狀、體征仍可能存在。
